Анализ на хламидии у женщин: как сдавать, методы диагностики, как берется биоматериал на хламидии способом ПЦР, ИХА, ИФА, РИФ?

Chlamydia Trachomatis — что это?

Из заболеваний, распространяющихся при половых контактах, хламидиоз считается самым опасным. Вызывается он Chlamydia trachomatis – внутриклеточными паразитами, похожими на бактерии и вирусы. Эта специфика является проблемой при лечении инфекции – привычные антибактериальные препараты с ней не справляются. Возбудители содержат, клеточную стенку, ДНК, РНК. Заражение происходит тремя способами:

• при незащищенном половом акте;
• бытовым путем;
• при беременности от инфицированной матери ребенку;

Chlamydia trachomatis не имеет собственных энергетических ресурсов, поэтому пристраивается к клеткам. Заражение человека начинается при накоплении в организме определенного количества паразитов. Опасности подвергается половая система. Хламидии в крови вызывают одно из тяжелых последствий – бесплодие. Заражение приводит к серьезным проблемам:

• для мужчин болезнь опасна развитием простатита, импотенции, хламидийной пневмонии;
• у женщин хламидии провоцируют выкидыши, спайки в малом тазу, преждевременные роды, опухоли матки.

Хламидия Трахоматис — единственный опасный для человека вид, принадлежащий к обширному классу Хламидий. Все представители этой группы микроорганизмов являются внутриклеточными паразитами, имеющими микроскопические размеры (максимальный диаметр экземпляра Хламидии Трахоматис достигает 350 нанометров).

Для человека представляет опасность только Chlamydia Trachomatis. Этот микроорганизм может вызывать массу патологий у женщин и мужчин. До недавнего времени обнаружить ДНК Хламидии было непросто, однако с открытием новых методов диагностики удалось установить причину множества заболеваний невыясненной этиологии. Оказалось, что причиной длительно протекающих хронических патологий стал хламидиоз трихоматис.

Выглядят хламидии крайне непримечательно, но при этом сочетают в себе признаки бактерий и вирусов. С первыми их роднит строение и способ воспроизводства, со вторыми — способ паразитирования.

Важно знать. Несмотря на то, что в настоящее время ей присвоено «звание» бактерии, ученые на вопрос — «Хламидия Трахоматис — что это такое, бактерия или вирус?» — не могут дать однозначного ответа.

Оболочка Chlamydia Trachomatis бесцветная, а внутри нее находятся типичные для такой формы паразитов признаки:

• ДНК и РНК (типичный признак бактерий, ведь у вирусов есть только ДНК);
• рибосомы и иные внутриклеточные и оболочечные компоненты, идентичные клеточным компонентам грамотрицательных бактерий;
• способ деления клетки на две идентичные, как у бактерий и простейших;
• обитание внутри клеток носителя (характерно для вирусов);
• микроскопические размеры (намного меньше, чем обычные бактерии, но чуть большие, чем вирусы).

Для Хламидии Трахоматис характерно двухступенчатое развитие. На начальном этапе микроорганизмы ведут себя, как типичный вирус, образуя при этом особую форму — элементарные тельца, адсорбирующиеся в цитоплазму клетки-носителя. Далее хламидии постепенно трансформируются в более совершенную, бактериальную внутриклеточную форму.

Суть метода ПЦР — обнаружение генетического материала (ДНК) в исследуемом образце и его достраивание путем добавления «строительного» материала (дезоксинуклеорибофосфатов). В результате цепь ДНК удлиняется, ее обнаружение становится возможным с помощью электрофореза и/или флюоресценции.

Все манипуляции выполняются в специальном приборе – амплификаторе, который самостоятельно контролирует смену температур и протекающих фаз соответственно числу необходимых циклов амплификации.

ПЦР позволяет обнаружить хламидии уже через 3 дня после заражения, при высоком риске исследование повторяют через 2 недели после предполагаемого инфицирования.

В настоящее время набирает большую популярность ПЦР-диагностика в режиме реального времени (у женщин этот тест называется Фемофлор). С его помощью исследуется и качественная, и количественная характеристика влагалищной микрофлоры.

ПЦР в режиме реального времени характеризуется короткими сроками выполнения, высокой специфичностью и чувствительностью (порядка 88-90%).

Совет этот актуален в ситуации, когда врач подозревает наличие хламидийной инфекции у пациентки, и исследование проводится для верификации диагноза. При отсутствии специфических симптомов у женщины более целесообразно проведение комплексной ПЦР (уровень обоснованности II).

Какие анализы на хламидии существуют

1. Иммунологические.

Направлены на выявление антигенов и антител. Используются ПИФ или ИФА.

2. Культуральный метод.

Проводится посев хламидий для их последующей идентификации.

Высеиваются эти бактерии только на среды, включающие живые клетки. Это клеточные линии L-929, McCoy, HeLa.

3. Молекулярно-биологические.

Используют ПЦР для выявления в мазке хламидий.

Проводится идентификация фрагмента ДНК бактерий.

Как правильно сдать анализ на хламидии

Заболевание длительный период после заражения может быть бессимптомным. Часто хламидиоз выявляется при диагностике других половых инфекций. Из-за особенностей биологического цикла возбудителя анализы проводят несколькими способами. Лабораторная диагностика хламидиоза включает методы исследования:

• первичный микроскопический анализ мазка;
• культуральный способ – посев биоматериала в специальную среду – дает точный результат;
• РИФ хламидиоза – определение реакции иммунофлюоресценции – возбудители светятся под микроскопом, отличается достоверностью.

Интерпретация результатов обследования имеет тонкости, поэтому должна проводиться квалифицированными специалистами. Анализ крови на хламидии ИФА расшифровывается по каждому виду иммуноглобулинов, говорит о периоде развития инфекции. При определении Igm результаты таковы:

• Положительный: со времени заражения прошло менее, чем две недели; если не обнаружены другие антитела, при наличии Igg, – обострение хронического воспаления.
• Отрицательный: хламидиоза нет – при отсутствии всех иммуноглобулинов; когда определяется Igg – заражение произошло не менее двух месяцев назад.

При анализах крови на наличие антител Iga результат трактуется так:

• Положительный: острая стадия хронический инфекции или при заражении, с момента которого прошло более двух недель; инфицирование ребенка при беременности.
• Отрицательный: хламидийное воспаление отсутствует; со времени заболевания менее 14 дней; невелика вероятность заражения плода.

При расшифровке теста на Igg выдаются такие результаты:

• При норме – отсутствуют, значение коэффициента позитивности в границах 0–0,99;
• Положительный: заболевание хламидиозом или его обострение произошло более трех недель назад.
• Отрицательный – в случае одновременного отсутствия иммуноглобулинов Iga Igm: хламидий в крови нет; полное выздоровление.

Тем, кто почувствовал признаки заболевания, имел незащищенный секс со случайным партнером, можно приобрести в аптеке экспресс-тест. С его помощью быстро определяется наличие заражения хламидиозом. Для анализа нужна моча или мазок у женщин. В инструкции описан метод их забора. Результат расшифровывается так:

• положительный – требует немедленного обращения к венерологу для назначения лечения лекарствами;
• отрицательная проба свидетельствует, что заболевание в момент проведения теста отсутствует.

Сдать анализы на хламидиоз можно по направлению врача- венеролога или гинеколога. Не исключено самостоятельно обращение пациента в медицинские учреждения при подозрении на инфицирование. Анализ крови на хламидиоз проводят такие организации:

• женские консультации;
• клиники планирования семьи;
• кожно-венерологические диспансеры;
• специализированные лаборатории для проведения исследований.

Сколько стоит анализ на хламидиоз

	Класс антител anti	Разбежка цен, р.
Иммуноферментный анализ – ИФА	IgM	350-750
	IgA	350-750
	IgG	350-750
Полимерно цепная реакция – ПЦР	?	180-300
Мазок на хламидии		200-400
РИФ хламидиоза		260-700

Для выявления микроорганизмов используют сразу несколько способов. Одного метода недостаточно, т.к. выявить заболевание сложно. Это связано с особенностями хламидий паразитировать в клетках. В этой характеристике микроорганизмы схожи с вирусами.

После попадания бактерий на слизистую оболочку, происходит их активное размножение путем деления. Инкубационный период болезни – 14-30 дней. Первые две недели после незащищенного полового акта инфекция никак себя не проявляет. Результаты анализа могут быть ошибочными в этот период. Это связано с микроскопическим размером паразитов.

Когда бактерии активно размножаются, местный иммунитет женщины ослабевает. Снижение защитных реакций приводит к сопутствующим заболеваниям и осложнениям.

Способы диагностики хламидиоза у женщин:

• экспресс-тест;
• мазок на флору;
• полимерная цепная реакция;
• иммунохроматографический анализ;
• иммуноферментный (иммуноморфологический);
• цитоскопический (РИФ, ПИФ метод);
• культуральный метод (бактериологический посев).

Каждый способ диагностики имеет свои особенности в сборе материала и подготовке к исследованию.

Для выявления инфекции проводят экспресс-тест. Он продается в аптеке. Производитель указывает, что достоверность метода 75%. Однако, практика показывает только 20-50% совпадений с медицинской диагностикой. Если результат окажется положительным, тест не освобождает от дополнительных анализов в клинике. По итогам ИХА врач не сможет назначить лечение.

Как определить хламидиоз у женщины иммунохроматографическим способом? Для анализа используют мочу или слизь из влагалища. На индикатор теста наносят приготовленный биоматериал. Перед сбором пробы производители рекомендуют:

• в течение 2 часов не опорожнять мочевой пузырь;
• накануне теста нельзя проводить спринцевание;
• не использовать вагинальные свечи и крема за несколько дней до проведения теста.

В противном случае достоверность результата останется под вопросом. Все что нужно для проведения теста есть в наборе вместе с подробной инструкцией по применению.

Противопоказаний к проведению экспресс-теста нет.

Такой метод используют после полового акта со случайным партнером или при подозрительных выделениях из половых путей.

Метод основан на принципе иммунной хроматографии.

Как только паразиты оказываются в области чувствительного элемента, они вступают в контакт с антителами. В результате реакции полоска индикатора окрашивается в красный цвет. Если хламидий нет, индикатор не меняет цвет.

Преимущества ИХА:

• возможность провести тест в домашних условиях;
• быстрый результат;
• не требуется специального оборудования для выявления инфекции;

Большинство врачей считают такой метод пустой тратой денег, т.к. лечение назначается по результатам лабораторных исследований.

При гинекологическом осмотре у женщины берут 3 мазка на флору:

• из мочеиспускательного канала;
• влагалища;
• шейки матки.

Как берется анализ на хламидии у женщин таким способом? Частицы выделений собирают специальной щеточкой. Процедура неприятная, но безболезненная. Для выявления хламидиоза проводят бактериологический посев материала. Обычное исследование под микроскопом не определит возбудителя инфекции.

Исследование безошибочно определяет наличие воспалительного процесса в половых органах. Вероятность выявить хламидии таким методом составляет всего 15%. Мазок берут наряду с другими способами диагностики.

Если женщина принимала антибиотики, и с приема последней таблетки не прошел месяц, анализ не проводят. Препараты убивают часть бактерий. Остальные хламидии временно бездействуют. Заболевание протекает в скрытой форме.

Плюсы метода:

• анализ проводят бесплатно в государственной поликлинике;
• позволяет выявить сопутствующие патологии.

Самый достоверный из методов. Точность исследования достигает 100%. Ложный результат бывает только при неправильном сборе и обработке материала. Этому способу отдают предпочтение большинство специалистов. Если результат положительный, сомнений по поводу хламидиоза быть не должно.

Материал для анализа:

• соскоб верхних клеток слизистых оболочек;
• моча, при симптомах поражения инфекцией мочеиспускательного канала;
• кровь – в ней могут присутствовать антитела к хламидиям.

Соскоб берут с верхнего слоя слизистой. Процедура безболезненная. Если в клетках оболочек есть паразиты, их обнаружат при проведении анализа. Исследование частичек слизистой проводят под микроскопом.

Если врач дал направление на анализ мочи, сдают первую утреннюю порцию. Объем материала 20-30 мл.

Антитела к хламидиям в крови – это косвенное доказательство инфекции. Иногда бактерии попадают в кровоток. Это серьезное отклонение, т.к. через кровь паразиты проникают в любую слизистую оболочку.

Исследование методом ПЦР проводят 1-2 дня. Данный способ является предпочтительным при диагностике заболевания.

Иммунная система в ответ на инфицирование вырабатывает антитела к паразитирующим микроорганизмам. Защитные клетки выявляют в крови или в соскобе слизистой оболочки половых органов. Точность ИФА – 60%, поскольку антитела к инфекции могут присутствовать в крови здоровой женщины. Преимущества метода:

• позволяет обнаружить микроорганизмы в крови на 10-20 день заражения;
• определяет форму заболевания – острую или хроническую;
• указывает на активацию плохо пролеченного хламидиоза;
• выявляет антитела к другим видам хламидий, не только к генитальным.

ИФА дополняет ПЦР. Эти два анализа проводят вместе. ИФА сдают также для проверки проведенного лечения. По результатам теста не всегда понятно, болеет ли человек на данный момент или инфекция была перенесена ранее.

В некоторых клиниках такой анализ называется цитоскопическим ПИФ методом.

Исследование материала проводят под флюоресцентным микроскопом. Если в клетках есть хламидии, наблюдается свечение. Микроорганизмы напоминают по форме звездочки. Вероятность ошибки составляет 50%.

Метод редко используют, т.к. легко спутать хламидии с другими группами бактерий. Чаще всего их путают со стафилококками. Играет роль и человеческий фактор. Если анализ проводит опытный врач, достоверность результата значительно увеличивается.

А как сдается анализ на хламидии у женщин с помощью бактериального посева? Для исследования у женщины берут мазок. Собранный материал помещают в питательную среду. Результат оценивают через 6-8 дней. Если в мазке есть хламидии, за этот период времени они размножатся и будут видны лаборанту. Достоверность результата – 100%.

После выявления бактерий, проводят исследование их свойств и период жизнедеятельности в организме больного.

Посев проводят редко по причине трудоемкости и высокой стоимости. Бактериальный посев рекомендуют:

• при возникновении медико-правовых конфликтов;
• для диагностики хламидиоза у девственниц;
• при подозрении на инфекцию во рту или в прямой кишке.

1. Как правило, результаты ПЦР и NASBA доступны уже через 24-36 часов, в частных лабораториях сроки готовности результатов удлинены.
2. Результат может быть «положительный» (хламидии обнаружены, то есть у пациента хламидиоз) и «отрицательный» (хламидии не обнаружены, то есть у пациента мочеполового хламидиоза нет или получен ложноотрицательный результат).

Кому требуется анализ на хламидии

В основном мазки берут на хламидиоз, если имеются клинические признаки, указывающие на воспалительный процесс нижних отделов мочеполовой системы. Сдать анализы на хламидии также необходимо, если был незащищенный половой акт с носителем хламидиоза.

Если нет ни медицинских, ни эпидемиологических показаний, то на хламидии женщины анализы могут сдавать в таких случаях:

• невынашивание беременности
• предстоящие внутриматочные манипуляции (кюретаж, гистероскопия, гистеросальпингография и другие)
• перед ЭКО
• предстоящий амниоцентез или биопсия ворсин хориона
• сексуальное насилие

Мужчины анализ на хламидии могут сдавать при обследовании на ИППП при планировании беременности, для диагностики бесплодия.

У новорожденных исследование проводится в случае конъюнктивита или пневмонии.

Расшифровка результатов

Расшифровать экспресс-тест можно самостоятельно по изменению окраски полоски. Путем сравнивания ее с эталоном, изображенным в инструкции, делают предположение о наличии возбудителя в организме пациента.

После проведения ПЦР-диагностики делают заключение о том, обнаружен возбудитель или же нет.

В случае иммуноферментного анализа после подсчета количества антигенов специалист определяет степень запущенности инфекции.

Если анализ проводился культуральным методом и включал исследования на чувствительность хламидий к антибиотикам, то в результатах обследования указывают тип и название выделенного микроорганизма, содержание бактерий (в КОЕ/мл), список антибактериальных агентов, активных по отношению к возбудителю (значок S) и тех, к которым хламидии имеют резистентность (значок R).

Для подтверждения результатов рекомендовано проводить полное обследование несколькими методами.

В 10-15% процентах случаев есть вероятность существования скрытой инфекции, которая протекает неочевидно и женщина может быть не в курсе своего заражения.

В первую очередь, проверка на зараженность хламидиями может потребоваться в следующих случаях:

• в момент выяснения причин бесплодия;
• при образовании внематочной беременности;
• при частых самопроизвольных абортах.

Обязательные анализы назначает врач, но мы постараемся донести до вас, какие именно анализы, как они сдаются и что обозначают.

1. Иммуноферментный анализ крови (ИФА), при помощи которого определяется титр антител (IgA, IgM, IgG) к хламидиям. Соответственно количеству (титру) того или иного вида антител определяется и фаза, в которой находится инфекция:

• острая;
• хроническая;
• ремиссия.

Важно знать, что амбулаторный период длится около недели и антитела уже выявляются по ее истечении, от момента заражения.

2. Реакция имунофлуоресценции (РИФ) – способ, который считается одним из максимально (до 80 %) точных анализов для выявления хламидий. Однако, максимально качественный результат исследования пропорционален профессионализму врача-лаборанта.

3. Полиразмерная цепная реакция (ПЦР) считается наиболее точным способом определения заражения хламидиями и суть ее состоит в том, чтобы обнаружить генный материал хламидий.

Что же до проведения исследований через мазок, то речь идет о мазке из шейки матки. Эта процедура в таких случаях служит, преимущественно, для подтверждения результатов предыдущих анализов. Здесь есть два способа исследования:

• при помощи микроскопа (довольно ненадежный способ изучения, помогающий выявить инфекцию, максимум, в 15 % случаев);
• при помощи полиразмерной реакции, которую, как и в случае с кровью, относят к максимально эффективным способам.

Очень редко в таких случаях назначают проведения анализа мочи, так как он не столь эффективен и суть его заключается в определении участков нуклеиновых кислот хламидий в пробе мочи. При этом, пациентке запрещается мочиться и подмываться около двух часов до начала анализа.

Для того, чтобы список был полным, придется упомянуть и наиболее «доступное» средство для определения заражения инфекцией – аптечные экспресс-тесты. Однако, их информативность столь низка, что не стоит рассчитывать на них. При подозрениях, все же, следует консультироваться с врачом.

Чем более новое и качественное оборудование и чем более опытен профессиональный врач-лаборант, работающий с анализами и реактивами, тем больше шансов на качественные результаты тестов. Пациентка же получает на руки справку с результатом (отрицательным или положительным) и, при возможности, предоставленной информацией о титрах антител при иммуноферментном анализе:

• первыми определяются Ig M, сигнализирующие об острой фазе только начавшейся (5 суток) инфекции;
• появление Ig А говорит о прогрессирующем заболевании;
• выявление антител Ig G возможно на третьей неделе, что говорит о переходе болезни в хроническую фазу.

Очень важно, чтобы сдача и расшифровка анализов проходили только по назначению и под наблюдением врача. Все, что может женщина сделать самостоятельно – это выявить характерные симптомы и обратиться к специалисту.

1. Контрольное исследование для оценки эффективности терапии назначается не ранее, чем через 1-1,5 месяцев после окончания приема препаратов (для ПЦР), и не ранее, чем через 14 дней для NASBA. Метод ПЦР не подразумевает определение жизнеспособности обнаруженных микроорганизмов, поэтому необходимо выждать полный цикл смены эпителия.
2. При сборе первой порции мочи после последнего акта мочеиспускания необходим перерыв не менее 3 часов. При обильных патологических выделениях из уретры мочу собирают через 15-20 минут после последнего акта мочеиспускания.
3. Существует мнение, что изменения гормонального фона приводят к появлению в исследуемом материале ингибиторов амплификации (слизь, кровь, гной и другие компоненты). Данная ситуация наиболее актуальна в период беременности, у женщин.

Предлагалось множество способов устранения данной проблемы, но пока ни один из них не является общепризнанным:

1. Ситуация с ингибиторами амплификации актуальна для небеременных женщин на 3 неделе после менструации.
2. При заборе материала в первые дни после менструации есть вероятность ложноотрицательного результата за счет недостаточного накопления возбудителя в эпителии. Таким образом, оптимальный период для взятия соскоба – 4 неделя после менструации.
3. Нет никакой необходимости в специальной подготовке пациентки (например, введения каких-либо препаратов, соблюдения определенной диеты) перед исследованием. На результат это не повлияет.
4. Существует проблема так называемого конкурентного ингибирования. Подобная ситуация возникает при использовании лабораторией наборов для ПЦР-диагностики нескольких видов микроорганизмов. При значительном преобладании в образце какого-либо одного вида возбудителя последний может «замаскировать» наличие других видов микроорганизмов. Результат будет ложноотрицательный.
5. При подозрении на ложноположительный результат возникает необходимость повторного исследования. Эта ситуация актуальна при бессимптомном течении инфекции с низкой бактериальной нагрузкой. В этом случае возможно исследование того же образца, либо забор нового, а также применение другого теста или даже метода исследования (класс рекомендаций В, уровень обоснованности II). При выявлении большого количества хламидий в исходном материале повторное исследование будет лишним и экономически необоснованным.

Структурная схема Anti-Сhlamydia trachomatis IgM

При подозрении на хламидиоз ИФА чаще используют как уточняющий анализ, а не как самостоятельный. По тому, какие типы антител выявит ИФА, можно судить о давности заражения и стадии хламидиоза:

• Anti-Сhlamydia trachomatis IgM — появляются спустя неделю после заражения, и исчезают — спустя 2-3 месяца; положительные IgM — это самый ранний признак заражения хламидиозом;

• Anti-Сhlamydia trachomatis IgA — появляются в крови через две недели после заражения и исчезают — спустя два-четыре месяца после успешного лечения. Положительные IgA — это признак активной инфекции (например, острой начальной формы или рецидива хронической болезни);

• Anti-Сhlamydia trachomatis IgG — появляются спустя три—четыре недели после заражения и сохраняются положительными в течение нескольких лет. Они могут быть как признаком хронического хламидиоза, так и признаком инфекции, которую уже успешно пролечили.

Стадия хламидиоза	IgM	IgA	IgG
Острый хламидиоз (заражение — одну-две недели назад)		–	–
Острый хламидиоз (заражение — две-три недели назад)			–
Острый хламидиоз (заражение — более трех-четырех недель назад)
Обострение давнего хламидиоза
Давний хламидиоз	–	/-	/-
Прошедшее (или проходящее) заболевание	–	–
Выздоровление	–	Уменьшение титра антител в 2-4 раза после проведенного лечения	Уменьшение титра в 4-8 раз через 1-1.5 мес после успешного лечения
Отсутствие хламидиоза или отсутствие антител к нему	–	–	–

Кроме положительных и отрицательных результатов, в описании ИФА можно встретиться с таким понятием, как «титр антител» — это концентрация антител к хламидии в крови пациента. По титрам антител оценивают эффективность лечения: если титры антител после хламидиоза снизились в 2-4 раза после проведенного лечения, то оно считается эффективным.

Положительные результаты ИФА оцениваются, как серопозитивность по хламидиозу (есть антитела к этой болезни в крови), отрицательные результаты — как серонегативность (антител к хламидиозу в крови нет).

Отрицательные результаты ИФА не гарантируют, что болезни нет: встречаются и такие формы хламидиоза, при которых антитела не вырабатываются. Если по данным ПЦР или бак посева наличие хламидий подтвердилось, то даже при отрицательных результатах ИФА ставят диагноз «хламидиоз».

Название	Расшифровка результата	Через сколько дней готов анализ	Цена в рублях
ПЦР	– хламидий нет, хламидии обнаружены	1-2	250-300
ИФА	– антитела не обнаружены /– сомнительно, есть небольшое количество антител антитела обнаружены	2-3	450-500
ПИФ	– антигены бактерий не обнаружены (отрицательный результат) антигены обнаружены (хламидии есть)	2-3	350-400
Посев	– рост не наблюдается, хламидий нет, рост есть, хламидии найдены	6-8	1000
Экспресс-тест	2 полоски – хламидиоз есть, 1 полоска – хламидиоза нет	10 минут	300
Цитологический метод	– хламидии в клетках не обнаружены, хламидии обнаружены	2-3	450

Если искали хламидии в крови методом ИФА, то расшифровка анализа крови на хламидиоз может быть с такими результатами: отрицательный, слабоположительный igg, сильноположительный. 

Напомним, как уже отмечалось ранее, иммуноферментным анализом не выявляется хламидия трахоматис, как таковая. ИФА крови показывает антитела или титры, которые вырабатываются организмом под действием инфекции. Антитела в крови к хламидиям называются IgG, IgA, IgM. Расшифровка результатов по титрам и нормы в таблице есть, и её с лёгкостью можно найти в сети.

Подготовка к анализу на хламидии

Соблюдение подготовительных рекомендаций позволяет получить более точные результаты анализов на хламидиоз.

Пациентам рекомендуют:

• не использовать системные антибиотики в течение минимум одной, а лучше – двух недель
• не применять местное лечение (кремы, вагинальные таблетки) в течение 3 дней
• отказаться от интимной жизни на 2 дня
• не мочиться за 3 часа до забора урогенитальных мазков
• женщинам 2 дня не пользоваться тампонами

У женщин берут анализ на хламидиоз по возможности в первой фазе цикла. Но нужно дождаться окончания менструальных кровотечений.

Как берут материал для исследования и как сдавать его правильно?

Анализ крови на хламидии производится по венозной крови, которая сдается утром натощак.

Подготовка к исследованию включает воздержание от алкоголя, жирной и соленой пищи, курения в течение суток. Перед сдачей биологического образца из уретры рекомендовано не мочиться в течение нескольких часов.

Перед культуральным исследованием необходимо прекратить прием антибиотиков и уросептических препаратов за 30 дней. При иммуноцитологических исследованиях антибактериальные препараты отменяют за 14 дней.

Накануне ПЦР женщинам рекомендуется отказаться от спринцевания, гигиенических процедур с антибактериальным мылом, использования вагинальных суппозиториев. Мужчинам перед сбором материала необходимо отказаться от использования медицинских средств для повышения потенции.

Как берут материал для анализа на хламидии?

К сдаче биоматериала необходимо подготовиться. И подготовка заключается в следующем: нужно выждать, когда наступит седьмой – девятый день менструального цикла, при этом менструальное кровотечение уже должно завершиться. Этот период называют идеальным для выявления возбудителей в организме женщины по экспертизе вагинального мазка.

Многих мужчин, из тех, кому предстоит анализ на хламидиоз такого плана, пугают процедуры. Стоит отметить, чтобы взять биоматериал на экспертизу, опытному доктору необходимы считанные секунды. Эта манипуляция при правильном подходе пусть и неприятная, но вполне безболезненная.

• соскоб или мазок из мочеиспускательного канала;
• из канала шейки матки;
• из ротовой полости и глотки;
• из анального канала и прямой кишки;
• из больших преддверных и околомочевых желез;
• из слизистой оболочки конъюнктивы глаза;
• также сдают анализ мочи и кровь на хламидии;

• соскоб или мазок из мочеиспускательного канала;
• из прямой кишки;
• из ротовой полости и глотки;
• из конъюнктивы глаза;
• мочу и кровь.

• соскоб или мазок из наружного отверстия мочеиспускательного канала;
• из преддверия влагалища;
• просто из влагалища;
• из прямой кишки;
• из ротовой полости и глотки;
• из конъюнктивы;
• и при использовании детских гинекологических зеркал — из канала шейки матки.

Мазок — это частицы выделений, которые собирают со слизистых оболочек пациента специальной щеточкой. В мазке содержатся разные бактерии, иммунные клетки человека и другие компоненты. Чтобы выявить именно хламидиоз, мазок чаще всего исследуют с помощью ПЦР или бактериологического посева. Обычное исследование мазка под микроскопом не определяет возбудителя этой болезни. Сдавать мазок на анализ совершенно не больно.

Микрофотография: клетки в мазке при хламидиозе во время анализа по Романовскому-Гимзе

Соскоб — это процедура, при которой берут самые верхние клетки слизистой (канала шейки матки, прямой кишки, глаз, уретры). На материале соскоба проводят более серьезное лабораторное исследование. В результате специалист может изучить уже не выделения, а сами клетки слизистой оболочки. Если внутри этих клеток есть хламидии, их будет видно.

В моче хламидии могут содержаться, если они поразили мочеиспускательный канал. Для анализа необходима первая утренняя порция мочи в (примерно 20-30 мл.). Основной метод исследования мочи на хламидии — это ПЦР.

В крови могут содержаться и косвенные признаки хламидий — антитела к ним; а иногда — и сами хламидии, если инфекция попала в кровоток. Специальной подготовки, чтобы сдать анализ крови на хламидии не требуется. Правильнее всего сдавать кровь на голодный желудок, или хотя бы спустя 4 часа после еды. Антитела исследуются с помощью ИФА, а сами хламидии — с помощью ПЦР.

Извлечение биоматериала из организма пациента и подготовка к сдаче анализов имеет свои особенности.

У женщин

В случае взятия проб из влагалища нельзя:

• мочиться за 2-3 часа до обследования;
• осуществлять спринцевание за сутки;
• подмываться перед забором пробы;
• использовать вагинальные свечи, кремы и другие средства в течение полутора суток до сдачи;
• применять диуретики или антибактериальные препараты (если курс уже начат, сообщить об этом заранее);
• сдавать биоматериал во время менструаций.

У мужчин

При заборе анализов из мочеиспускательного канала мужчины нельзя:

• мочиться в течение 3 часов до обследования;
• использовать дезинфицирующие средства, делать промывание уретры;
• мыться антибактериальным мылом;
• применять антибиотики (в случае использования предупредить об этом специалиста, выполняющего извлечение материала);
• заниматься сексом за сутки до взятия пробы.

Мазок выполняют стерильным ватным тампоном, для соскоба используют зонды. Анализы из половых органов у мужчин берет врач-уролог, у женщин – гинеколог. Эта процедура занимает 3-5 минут времени, возможны неприятные ощущения.

Это может быть:

• соскоб из уретры
• моча
• секрет простаты
• слюна
• мазок из заднего прохода
• отделяемое глаза
• орофарингеальный мазок

Чаще всего берут мазки из уретры.

1. Помещают в мочеиспускательный канал тампон на глубину около 3 см.

2. Вращают его внутри мочеиспускательного канала.

3. Вынимают и помещают в пробирку.

Точно так же берут материал у женщин. Но у них вводится тампон до 1-2 см.

При наличии большого количества выделений их вначале удаляют, а только после этого берут мазок. После этого берется цервикальная проба.

Наружное отверстие канала шейки матки очищают от влагалищных выделений. Затем тампон вводится в канал. Его вращают несколько секунд. После этого вынимают и помещают в пробирку.

Влагалищные мазки берут без использования гинекологических зеркал.

Тампон вводят во влагалище и берут мазок с задней его стенки.

При получении анального мазка тампон вводят в прямую кишку на 2-3 см.

Материал врач должен собрать со всех стенок. При этом двигаются по направлению кнаружи и совершают круговые движения.

При заборе орофарингеальных мазков их берут из глотки и миндалин.

Из конъюнктивы берут гнойное отделяемое в случае его наличия. В ином случае необходимо отвести нижнее веко и провести тампоном по слизистой оболочке в направлении к медиальном углу глаза.

Посев на хламидии

Метод основан на выделении бактерий на культуре живых клеток.

Хламидии лишены возможности накапливать энергию в виде АТФ. Они являются энергетическими паразитами. Поэтому должны находиться только внутри клетки. На искусственных питательных средах эти бактерии не растут.

До восьмидесятых годов прошлого века посев был основным анализом на хламидиоз. Основное преимущество – близкая к 100% специфичность. Но сегодня метод применяется редко. Его не используют в рутинной практике.

1. Судебно-медицинская экспертиза.

2. Диагностика хламидиоза у лиц, подвергшихся сексуальному насилию.

3. Необходимость оценки чувствительности к антибиотикам.

Недостатком культуральной диагностики является недостаточно высокая чувствительность метода. Она составляет всего 50-70%. Это связано с тем, что хламидия – очень неустойчива во внешней среде. Она погибает при неправильной транспортировке или хранения материала. А также в случаях, если пациент использовал до забора биоматериала местные антибактериальные средства.

После получения материала его транспортируют при температуре не более 6 градусов. Затем помещают в лунки планшетов, содержащие слой клеток. Инкубация длится от 2 до 3 суток.

Затем полученный препарат обрабатывают флуоресцирующими антихламидийными антителами и просматривают в люминесцентный микроскоп. Результат считают положительным при обнаружении по крайней мере одного внутриклеточного хламидийного включения.

Определение антигенов хламидий при помощи ИФА

ИФА-АГ основан на обнаружении антигенов путем их взаимодействия с моноклональными антителами.

Методы тестирования могут быть разными. Это прямое обнаружение антигена.

Дополнительно может использоваться ферментная аппликация, повышающая чувствительность ИФА-АГ.

Преимущества:

• процесс автоматизирован, можно исследовать много образцов за короткое время
• низкая стоимость

Недостатки:

• низкая специфичность
• чувствительность 20-85% (показатели зависят от применяемой тест-системы)
• могут использоваться только уретральные и цервикальные мазки

Часто ИФА-АГ дает ложноположительные результаты. Потому что определяются липополисахариды хламидий. Поэтому возможны перекрестные реакции с ЛПС других бактерий.

Пути заражения хламидией

Хламидиоз трахоматис от человека к человеку может передаваться только при непосредственном контакте с носителем или предметами, на которых присутствует микроорганизм. Наиболее часто заражение хламидиями происходит во время полового контакта. При этом не играет роли, каким будет секс — Chlamydia Trachomatis одинаково успешно передается при оральном, генитальном и даже анальном сексе.

Известны также случаи, когда заболевание передавалось без непосредственного сексуального контакта. Особенно часто опасности бытового заражения хламидиями подвергаются женщины. Инфицирование у них может произойти при использовании полотенца больного человека, предметов его личной гигиены (как ни странно, но подцепить хламидию можно даже с кускового мыла), нижнего белья. Очень часто инфекция передается ребенку от матери во время внутриутробного развития или при родах.

Важно знать. Хламидии могут сохранять жизнеспособность в условиях жилого помещения около двух суток. Все это время микроорганизмы остаются опасными для человека.

Чем опасна  Хламидия Трахоматис

Заболевания, которые вызывают Хламидии Трахоматис у женщин и мужчин, зачастую касаются только мочеполовой системы. В перечень заболеваний, спровоцированных этим микроорганизмом, входят:

• циститы, уретриты и цистоуретриты;
• парауретриты;
• эпидидимиты, орхиты и орхиэпидидимиты;
• фуникулиты и везикулиты;
• вульвиты и кольпиты;
• куперит и бартолинит;
• эндоцервицит и цервицит;
• эндометрит и сальпингит.

Хламидия Трихоматис у женщин может провоцировать сложнейшие, не поддающиеся лечению спаечные процессы и рецидивирующее возникновение эрозий шейки матки и эндометрия матки. На фоне активности инфекции наблюдается вялотекущий сальпингоофорит и другие воспалительные процессы. Примерно в половине всех случаев хламидийная инфекция у женщин заканчивается бесплодием.

Хламидия Трихоматис у мужчин может быть причиной затяжного рецидивирующего простатита в хронической форме. Вследствие такой патологии у больных нередко развивается эректильная дисфункция, появляются проблемы с детородными функциями.

Хламидийная инфекция у женщин и мужчин может поражать и другие органы и системы. Так, примерно у четверти всех носителей микроорганизма наблюдается хронические воспаления конъюнктивы, артриты, пневмония. Особенно опасно, если инфекция начнет атаковать сердечно-сосудистую систему. В этом случае у больного наблюдаются сбои сердечного ритма, может развиваться воспаление сердечной сумки (перикардит).

Стоит помнить. Примерно 60% больных хлимидиозом мужчин и женщин вовсе не ощущают, что они больны. Однако даже при скрытом течении инфекции происходит постепенное изменение состояния тканей и органов.

Анализ на хламидии при беременности

Часто назначается обследование на хламидиоз на этапе планирования беременности. Или после её наступления на ранних сроках. Потому что хламидии опасны для плода.

Ещё на этапе планирования женщина может столкнуться с проблемами при попытке забеременеть. Потому что хламидия провоцирует рубцовые процессы в матке и фаллопиевых трубах. Она нарушает миграцию плодного яйца в маточную полость и препятствует его внедрению в эндометрий.

Если беременность наступила, то хламидия повышает риск бластопатии в первые 2 недели развития эмбриона. Результатом становится его внутриутробная гибель. До 12 недели возможны эмбриопатии. Они ведут к трубным порокам развития.

После 12 недели возможны такие осложнения беременности:

• фетопатии
• хориоамнионит
• преждевременные роды

Во время родов мать может заразить хламидиозом ребенка. У него может развиться воспаление глаз или респираторных органов.

У самой женщины возможен послеродовый эндометрит, вызванный хламидиями. Поэтому положительный анализ во время беременности – основание для проведения лечения.

Вовремя гестации не используют доксициклин и фторхинолоны.

Препаратом выбора остается джозамицин. Может использоваться азитромицин.

Симптомы

Симптоматическая картина при заражении хламидией у мужчин и женщин не отличаются от большинства инфекций, передающихся половым путем. В 90% случаев признаки инфицирования появляются спустя некоторое время после незащищенного полового контакта. Представлены они такими симптомами, как:

• прозрачные выделения, похожие на жидкое стекло, иногда с желтоватым оттенком;
• слабые рези и жжение при мочеиспускании;
• зуд в уретре.

Спустя 1-1,5 недели у больных появляются признаки интоксикации организма в виде общего ухудшения самочувствия и небольшого повышения температуры тела. Далее хламидии умело приспосабливаются к иммунным атакам, в результате чего симптоматика ослабевает. Обострения происходят после простудных заболеваний, переохлаждения, стрессов.

• исследование мазка из уретры с окраской по Романовскому-Гимзе;
• иммунофлюоресценция;
• культуральный посев на питательную среду отделяемого из уретры;
• иммуноферментный анализ крови (ИФА);
• ПЦР-анализ;
• молекулярная амплификация отделяемого из цервикального и уретрального каналов.

Наиболее достоверными и высококачественными считаются методы ПЦР и культуральный посев.

Стоит знать. При бессимптомном течении хламидиоза выявить его случайно практически невозможно. Для постановки верного диагноза требуется целенаправленное обследование на предмет именно этой инфекции.

Устранение хламидийной инфекции — дело долгое и непростое. Так как Хламидия Трахоматис скрывается внутри клеток больного человека, для ее уничтожения нужно использовать комплексную антибактериальную терапию. Обязательным условием эффективности препаратов является способность их активных веществ проникать через клеточную мембрану.

Также больным назначается комплекс лекарственных препаратов, действие которых будет способствовать уменьшению негативного воздействия инфекции на внутренние органы и системы:

• иммуномодуляторы;
• пребиотики;
• гепатопротекторы;
• ферментативные средства;
• протеолитики и прочие.

Схемы терапии, перечень лекарств и дозировка определяются индивидуально. Лечение должны пройти все половые партнеры больного человека. Предварительно им назначается комплексная диагностика.

Что делать, если в анализе обнаружены хламидии

При положительном анализе на хламидию требуется лечение. Это патогенный микроорганизм.

В норме он должен отсутствовать в урогенитальном тракте. Поэтому при подтверждении диагноза проводится лечение.

Однако следует учитывать, что диагноз не может быть подтвержден с помощью ИФА. Потому что этот тест недостаточно специфичен.

Лечение можно начинать после установления наличия хламидиоза при проведении ПЦР или культурального исследования. Терапия проводится антибактериальными препаратами. Их выбирает врач.

При этом могут учитываться данные чувствительности к антибиотикам. Они будут у врача, если подтверждение диагноза осуществлялось культуральным методом.

Сколько времени понадобится, чтобы выяснить причины, почему появились симптомы инфекционного заболевания половой сферы? Исследование на хламидии делается от нескольких часов до недели. Сколько придется ждать результат, зависит от того, по какому материалу и каким способом проводились анализы.

И если итоги экспертизы крови могут отдать на руки пациенту или отправить лечащему врачу уже на следующий день, чтобы сделать бакпосев, необходимо около недели. Многие пациенты спрашивают о том, почему так долго готовился анализ? Но здесь процесс не ускорить – такова технология проведения экспертизы.

Повторный анализ на хламидии

Лабораторные исследования проводят не только для первичной диагностики инфекций. Анализы на хламидиоз делают и для того, чтобы проверить, излечился ли человек.

После курса лечения диагностика проводится через месяц. Используют ПЦР.

Возможно также применение культурального метода спустя 14 дней после терапевтического курса.

По анализам можно понять, вылечился ли человек от хламидиоза. Если анализ отрицательный, то дальнейшая терапия ему не нужна. Если нет, проводится повторный курс. Препарат обычно меняют.

Предполагается, что если первый курс терапии не сработал, то у хламидии низкая чувствительность к использовавшемуся антибиотику.

Введение

Более подробно о хламидиях трахоматис (Chlamydia trachomatis) и путях заражения можно узнать в этой статье (перейдите по внутренней ссылке). А здесь мы подробнее остановимся на методах диагностики мочеполового хламидиоза и расшифровке возможных результатов анализов.

Самой первой серологической пробой, внедренной для подтверждения диагноза «урогенитальный хламидиоз», была реакция связывания комплемента (сокращенно РСК). Проба быстро утратила свою актуальность из-за высокой частоты ложноположительных результатов.

На протяжении двух десятков лет одним из самых информативных способов диагностики урогенитального хламидиоза считался метод прямой иммунофлюоресценции с использованием моноклональных антител. На фоне вышеперечисленных методов он отличался несколько более высокими показателями специфичности и чувствительности. Вместе с тем, метод требовал обеспечения лаборатории дорогостоящим оборудованием и реагентами.

Еще один метод, актуальный и по сей день, – выявление хламидий в культуре клеток. Этот метод будет описан ниже.

Согласно Федеральным клиническим рекомендациям, для диагностики мочеполового хламидиоза могут использоваться:

1. ПЦР-диагностика. Федеральными и Европейскими клиническими протоколами для диагностики урогенитального хламидиоза рекомендован метод амплификации ДНК. В отношении первичного выявления инфекции его специфичность равна 100%, чувствительность 98-100% (уровень доказательности А, уровень обоснованности I).
2. NASBA (метод амплификации РНК).
3. Выделение хламидий в культуре клеток.
4. Цитологический метод. Этот метод исследования мазка малоинформативен при диагностике мочеполового хламидиоза (специфичность 10-12%): есть небольшая вероятность обнаружения внутриклеточных включений – так называемых телец Гальбершетдера-Провачека. Помимо этого, при микроскопии проводится подсчет числа лейкоцитов (увеличение их количества — доказательство воспалительного процесса), а также исследование флоры и обнаружение дрожжеподобных грибков.
5. Серологические тесты.
6. Последние три метода (3,4,5) могут применяться только в определенных ситуациях, когда недоступны методы амплификации ДНК и РНК (ПЦР и NASBA).

Анализы на хламидии назначаются:

1. Скрининг  половых инфекций при беременности и предгравидарная подготовка.
2. Желательно ежегодно сдавать анализы женщинам и мужчинам в возрасте до 25 -30 лет, а также лицам, не имеющим постоянных партнеров на протяжении последнего года или недавно сменившим партнера.
3. Лицам, имеющим симптомы уретрита, вагинита, цервицита.
4. Женщинам с ВЗОМТ (сальпингоофорит, эндометрит и так далее).
5. При обнаружении у пациента любой другой половой инфекции.
6. Мужчинам молодого возраста с воспалением придатков яичка и орхитом.
7. При подготовке к внутриматочному вмешательству.
8. При пневмонии и гнойном конъюнктивите у новорожденного.

Амплификация РНК хламидий (NASBA)

Это относительно новый для России, но более информативный молекулярно-биологический метод. Суть его заключается в обнаружении в материале (мазке, соскобе, моче и так далее) цепей РНК, наличие которых сопровождает процесс построения и жизнедеятельности клетки хламидии.

РНК является транспортировщиком генетической информации от ДНК и строителем клеточных структур возбудителя путем синтеза белка.

Именно по наличию РНК в положительных результатах NASBA можно судить об эффективности проводимой антибактериальной терапии: оценивается жизнеспособность хламидий. ПЦР, основанная на обнаружении только ДНК, такой возможности не имеет.

Какой материал берут для анализа на хламидии?

По статистическим данным, хламидиозом инфицировано около миллиарда человек. Наиболее подвержены хламидиозу мужчины.

Коварен этот недуг тем, что он симптоматически мало себя проявляет. Настораживающие симптомы могут появиться в острой стадии заболевания, в хронической хламидиоз практически неизлечим.

Эта инфекция предается следующими путями.

1. Через половой контакт. Заражение обычно случается при незащищенном сексе. В отличие от других венерических заболеваний, например, таких как гонорея, вероятность заражения хламидиозом значительно ниже.
2. Бытовым путем. Через общие гигиенические принадлежности, полотенца, щетки. Через предметы быта, располагающиеся во влажных затемненных местах.
3. Во время родоразрешения. Ребенок во время движения по родовым путям может получить значительную долю инфекции через секрет влагалища. Это может вызвать конъюнктивит и пневмонию у новорожденного. Вообще хламидиоз очень опасен для беременных, поскольку способен проникнуть в околоплодные воды и вызвать различные отклонения и патологии у будущего малыша.
4. В медучреждениях через нестерильные приборы. К сожалению, случается и такое. Обычно заражение происходит во время взятия биологического материала на исследования.

Микробы хламидиоза внедряются в клетки организма и разрушают их изнутри, используя все ее питательные вещества. Таким образом, заболевание быстро прогрессирует, первые симптомы обычно появляются спустя несколько недель.

Основными сигналами этого заболевания у дам являются следующие:

• ноющая боль в животе;
• нехарактерные кровянистые выделения;
• зуд во время опорожнения мочевого пузыря;
• повышение температуры;
• покраснение и припухлость гениталий.

У сильной половины человечества этот недуг дает о себе знать следующими симптомами:

• слабые боли в области паха;
• кровянистые прожилки в эякуляте;
• жжение во время опорожнения мочевого пузыря;
• повышенная температура и слабость
• поющая боль в пояснице.

Болеют хламидиозом в большинстве случаев сексуально активные молодые люди в возрасте от 15 до 30 лет. Это заболевание ослабляет иммунную систему человека, делая ее уязвимой перед другими видами половой инфекции, например, гонореей, трихомониазом, уреаплазмозом.

Для того чтобы не заразиться этим трудноизлечимым заболеванием нужно соблюдать необходимые меры предосторожности.

Разумеется, подобного рода инфекции не проходят для организма бесследно. Хламидиоз вызывает следующие осложнения:

• хронические воспалительные заболевания органов малого таза;
• простатит и проблемы с эрекцией и эякуляцией;
• сужение семявыводящих протоков и уретры;
• артрит, конъюнктивит, воспаление мошонки;
• заболевания легких

Мужчины сдать анализы на хламидии могут у врача-уролога, врача-дерматовенеролога, врача-репродуктолога, андролога.

Материалами для исследования у мужчин обычно служат:

• Отделяемое из уретры, соскоб из уретры. Подготовка пациента: перед забором материала не мочиться 2-3 часа, при обильных выделениях — 15-30 минут. При наличии обильных патологических выделений (например, гноя) рекомендуется удалить их ватным тампоном.

Процедура взятия соскоба для мужчин достаточно неприятна, порой болезненна. Соскоб забирается универсальным зондом из наружного отверстия уретры. После забора рабочая часть зонда отламывается и погружается в пробирку «Эппендорф» с консервирующей жидкостью.

• Первая порция свободно выпущенной мочи (чувствительность выше, чем у женщин — 85-95%).
• По показаниям для анализа на хламидии у мужчин может забираться секрет предстательной железы (при бесплодии, простатите и др. заболеваниях). Подготовка включает половое воздержание в течение 2 дней. Секрет простаты берет квалифицированный специалист после массажа предстательной железы.  Головку полового члена необходимо очистить стерильным ватным тампоном.

После завершения массажа выделившийся сок предстательной железы в количестве 0,5-1 мл собирают в сухую пробирку «Эппендорф» и плотно закрывают. При отсутствии секрета — собирают первую порцию мочи (в ней и будет содержаться весь секрет) по аналогии с обычной вышеописанной техникой.

Максимальный срок хранения всех вышеперечисленных материалов – 24 часа при строгом соблюдении температурного режима в диапазоне 2С… 8С.

Доставляется материал в специальном термоконтейнере с охлаждающими элементами. Для долгосрочного хранения взятый материал необходимо заморозить на срок не более 1 месяца при температуре -20С. Допускается только однократное размораживание материала.

У мужчин

Иммуноферментный анализ

Согласно последним Федеральным рекомендациям, иммуноферментный анализ (ИФА) не применяется для диагностики неосложненного урогенитального хламидиоза (цервицитов, уретритов и др.). Такое «недоверие» обусловлено тем, что ИФА больше актуален для тяжелых, глубоких поражений хламидиями C. Trachomatis.

Метод ИФА основан на обнаружении в крови специфических антител, вырабатываемых в ответ на антигены хламидий. По сочетанию трех классов иммуноглобулинов в крови пациента можно судить о тяжести и длительности инфекционного процесса.

Как уже было сказано, данный метод при выявлении урогенитального хламидиоза имеет ряд недостатков:

1. Не информативен в диагностике восходящей инфекции, цервицита и уретрита.
2. Высокая частота перекрестных реакций.
3. Высока частота ложноположительных реакций.
4. Не подходит для контроля излеченности после проведенной антибактериальной терапии, так как неизвестно время существования в крови специфических антител;
5. Позволяет диагностировать преимущественно глубокие поражения, например, врожденный хламидиоз у новорожденных (класс рекомендаций А, уровень обоснованности I).

Для проведения ИФА используется венозная кровь пациента, взятая натощак. В защиту данного метода можно отметить:

1. Его более низкую стоимость, по сравнению с ПЦР.
2. Удовлетворительная специфичность порядка 90%.
3. Быстрота выполнения.
4. Простота забора и хранения материала.

Выявление хламидий в культуре клеток (на среде McCoy)

Этот метод уникален тем, что позволяет оценить не только качество проведенной терапии, но и определить чувствительность хламидий к различным группам антибактериальных препаратов.

Суть метода состоит в заражении обработанной культуры клеток забранным материалом с последующим посевом на питательную среду и инкубированием в течение двух суток. Наличие хламидий в полученных клетках определяется методом ПЦР.

Для определения чувствительности к антибиотикам в обработанную культуру клеток вносят ростовую среду с содержанием определенного антибактериального средства и инкубируют в течение 5 суток.

Эффективность препарата определяют по отсутствию или замедлению роста в определенных группах. Наличие роста свидетельствует о резистентности к добавленному в  питательную среду антибиотику.

Недостатки этого метода диагностики — длительность (7 дней) и дороговизна, поэтому в клинической практике он используется в крайне редко. Обычно показанием для его назначения служит длительная неэффективная антибактериальная терапия.

Экспресс-методы

За рубежом в качестве рутинных, недорогих методов выявления хламидийной инфекции используются модифицированные серологические тесты.

Тест-система работает по принципу твердофазного ИФА-анализа. Готовая тест-система покрыта полученными путем генной инженерии, готовыми специфическими антителами. Данные антитела связаны со специальным ферментным комплексом.

При связывании антигенов с антителами ферменты высвобождаются, появляется желто-зеленое свечение, интенсивность которого и учитывает спектрофотометр.

В отличие от распространенного ИФА, где материалом для исследования служит кровь, при использовании данной тест-системы субстратом служат мазок или соскоб, взятые у женщины, мужчины. Чувствительность этого метода — около 65-70%, а специфичность 90-100%.

В основе реакции иммунофлюоресценции (РИФ) лежит прямое связывание антигенов с мечеными антителами, дающими зеленое свечение. Хламидийные тельца подсвечиваются внутри клетки. Результат оценивается при люминисцентной микроскопии.

Чувствительность данного метода — около 50%, что связано с высокой частотой ложных результатов. Это обусловлено и субъективным восприятием результата (исследование проводит лаборант), и высокой вероятностью перекрестных реакций, и нарушением техники забора биологического материала. С помощью данного метода невозможно оценить эффективность проведенного лечения.

На фоне всех недостатков главными плюсами РИФ остаются низкая стоимость, простота выполнения и короткие сроки получения результата. Именно поэтому РИФ еще используют в некоторых странах в качестве рутинного исследования на мочеполовой хламидиоз.

Как подготовиться к сдаче?

Чтобы результаты анализов были достоверны, требуется не только опыт врачей и лаборантов, но и ответственность самих пациентов: есть правила, которые нельзя нарушать. Рассмотрим, как правильно сдавать кровь на хламидиоз и как подготовиться к мазку на хламидии женщинам (в том числе беременным) и мужчинам.

Обследование на хламидиоз нужно проводить до того, как человек начал принимать антибиотики. Причина в том, что антибактериальные препараты убивают хламидий или «загоняют» в скрытую форму. Значит, обнаружить бактерии после такого лечения будет очень трудно. Если человек принимал любые антибиотики за несколько дней до сдачи анализов (например, лечил ангину), то первый тест рекомендуется сдавать только через месяц после приема последней таблетки.

1. Если пациент ранее лечился местными антибактериальными препаратами (мазями, кремами, растворами антисептиков), то первый анализ рекомендуется сдавать только через 2 недели после лечения.

2. Cдавать материал из мочеиспускательного канала (слизь/мочу) как мужчинам, так и женщинам нужно либо до мочеиспускания, либо через 3 часа после него.

3. Анализ на хламидиоз у женщин проводят между менструациями: не позже, чем за 5 дней до менструации, или не раньше, чем через 5 дней после нее. Желательно, чтобы материал для анализа брали в первую половину цикла. Однако, если у женщины есть признаки сильного воспаления, то имеет смысл сдать анализ как можно быстрее, исключая только период самой менструации. За день до анализа нельзя проводить никакие спринцевания влагалища.

4. УЗИ), мужчинам — в уретру.

5. Беременные женщины сдают анализы по тем же правилам, что и женщины, не ожидающие ребенка. Разумеется, на них не распространяются ограничения, связанные с менструальным циклом.

Для достоверности результата женщина должна соблюдать правила подготовки:

• Мазок делают до мочеиспускания или через 3 часа после него.



• Мазок желательно сдавать в первой половине менструального цикла: не раньше 5 дней до прихода месячных и не позже, чем за 5 дней до них.

  Если есть воспаление, это правило не соблюдают, т.к. с лечением нельзя затягивать.

• Перед анализом не проводят спринцевание.
• За 2 дня до сдачи мазка соблюдают половой покой.
• Не принимают антибиотики за месяц до исследования.
• Сдают утреннюю порцию мочи, т.к. она более концентрированная.
• Кровь сдают натощак. Если анализ проводят днем, с момента приема пищи должно пройти 4 часа.
• Не пользоваться вагинальными свечами и мазями за 2 недели до исследования.
• Не проходить обследование половых органов с проникновением во влагалище. Например, кольпоскопию, вагинальное УЗИ.

Правила подготовки распространяются на все методы диагностики. Если женщина недавно лечилась антибиотиками или местными антибактериальными средствами, анализ проводят позже.

На беременных женщин распространяются все правила кроме рекомендаций по дням менструального цикла.

Попытки самолечения приводят к переходу болезни в хроническую стадию. Лечение комплексное, основанное на приеме нескольких действующих средств, которые требуют правильного сочетания. Иначе терапия не даст результата или приведет к осложнениям.

После проведения лечения необходимо, спустя несколько недель сдать анализ на бактерий. Проверять наличие хламидий необходимо несколькими методами. В этом случае лучше использовать наиболее точные методики определения, такие как микробиологические исследования и ДНК-анализ. Все анализы должны показать отрицательный результат, если хотя бы один из них будет положительным, то лечение необходимо начать снова.

В этом случае такие упрощенные и низкоточные методы исследования как мазок и анализ на хламидиоз в крови не подойдут. Их лучше вообще не использовать, поскольку они могут смутить, дав ложный результат.